服务与技术服务类问题

问题:关于技术问题我怎样联系你们?
答案:请发邮件至:
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我们将尽快通过电子邮件回复您的问题。

问题:我应怎样制备及需要寄送多少DNA样品?
答案:您需要确认您的DNA样品是正确的构建体(通过酶切、PCR或测序),进行标准化的质粒抽提,样品必须没有胶粒(可直接用于注射),质量达到Qiagen midi/maxi试剂盒水平,最好溶解于高纯度水中,也可以用TE或Qiagen EB溶解,浓度至少为0.5 µg/µl。对于P-element转基因服务,样品总量至少为50 µg;对于PhiC31转基因服务至少为20 µg;对于CRISPR转基因服务每个组分至少为20 µg或至少30 µl预混合液。

如果您订购了DNA制备服务 (Service Z),请提供至少3~5 µg质粒样品,用于细菌转化和质量控制(通过酶切反应或PCR验证)。如果您直接寄送菌种,请用带螺旋帽的离心管寄送菌液,或寄送琼脂穿刺管请通过电子邮件或随样品提供质粒图谱、序列或酶切信息。

问题:我可以使用自己的P-element转座酶辅助质粒吗?
答案:可以。通常情况下,由我们提供转座酶辅助质粒与您的P-element质粒配制后共注射。如果您想用您自己的辅助质粒,请寄送Qiagen midiprep质量,浓度>0.5 µg/µl,总量>20 µg的辅助质粒。

问题:我可以使用自己的果蝇品系进行注射吗?
答案:可以。除了w1118yw和我们网站已列出的品系,我们也可以注射您的果蝇品系,每个新品系的服务费为700元。详情请参见新果蝇品系

问题:胚胎可以保持在18℃环境下进行注射或培养吗?
答案:可以,只有当您在订单备注里或在电子邮件里明确提出此要求的情况下,我们才会如此操作。如果您认为您的目的片段可能对果蝇致死或质粒上的目的片段由热激启动子(heat shock promoter) 或类似启动子控制,转基因服务在适宜阶段或全程需要18℃培养和操作,请您提前通知我们! 由于18℃环境下果蝇生长放缓,服务完成时间将相应延长。

问题:我多长时间能收到注射后的幼虫或转基因品系?
答案:我们收到您的DNA样品后将顺序安排注射。以服务流程最短的Plan A 为例,如果一切顺利,从收到可直接注射的DNA、完成注射到交付幼虫的周转时间通常不超过12个工作日。对于不同服务类型(参见技术服务和价格),交付时间根据是否进行DNA制备和果蝇的生命周期相应增加。我们优先用FedEx寄送果蝇幼虫或成虫。

问题:我能否使用自己提供的除了FM7i, CyO, TM3, TM6B之外的平衡子品系?
答案:通常情况不可以,如果您的确有需要,您可以发送电子邮件至:
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问题:服务完成并交付后,每个转基因品系可以继续在贵公司保存多久?
答案:对于Plan B/C/E/F/H/I/J/K/M/N/RH/RI,我们将在您签收转基因品系后保存两周。如果您收到果蝇后出现任何问题请在两周内通知我们,便于重新寄送备份果蝇给您,并延长2周备份时间。


Phi31系统相关问题
问题:哪个 PhiC31品系表达效率较高? 
答案:PhiC31列出了我们实际观察的红眼深浅,可以作为参考,虽然white基因表达并不能完全代表目的片段在attP位点的表达效率。

问题:哪个PhiC31品系转基因效率较高?
答案:PhiC31汇集了我们过往工作中各个品系的转基因效率评分,对于P{CaryP}、FlyC31和P[acman]和其它适用品系也汇集了>30 kb的BAC质粒的转化效率评分。以上数据我们将继续统计并定期更新。

问题:对于PhiC31系统的DNA样品质量有无特殊要求?
答案:与P-element系统的DNA样品质量要求相同。有数据显示CsCl梯度离心法纯化的DNA转基因效率更高 (~2倍),但如果您对CsCl梯度离心法不熟悉或耗费较大,用Qiagen midi/maxi 试剂盒即可满足要求。

问题:我在哪里可以得到FlyC31/P[acman]/MiMIC系统的载体?
答案:请参看Basler实验室Fly31网站的相关页面,pUASTattB及pattB载体可直接发送邮件给作者,Bellen实验室的载体可以从DGRC (Drosophila Genomic Resource Center) 直接订购。